细胞爬片需要什么材料?
首先爬片用玻片,需要泡酸,然后高压灭菌,大小视你所用培养板的大小裁定。
如果你的细胞贴壁能力不好的话,还要准备多聚赖氨酸,用于包被爬片玻片。
还有就是你常规细胞培养用的东东了。
方法:
事先在培养板里滴上一滴培养基或PBS,然后将灭好菌的(或多赖包被)的玻片放入,利用培养基的表面张力吸附玻片,是玻片与培养板之间没有空隙的贴合在一起。
然后就是正常消化细胞,调整细胞密度,接种到你事先准备好的爬片用培养板内就可以了。
如何做细胞爬片
细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多聚赖安酸处理过的片子上,细胞贴得更牢固。
制作方法:将片子放在细胞培养板(均已经消毒)中,加入一定数量的细胞悬液,让它生长24小时。待它贴壁后,细胞爬片就制作好了。
需要的器材:多聚赖安酸、合适大小的盖玻片(根据细胞培养板孔大小而定)、细胞培养板、培养基。